تشويه الدم: الخصائص والأنواع والتقنيات والأنسجة

مسحة الدم هي مسحة دم طرفية تستخدم لتحليل المكونات الموجودة في الدورة الدموية. توفر مراقبة لطاخة الدم بيانات دموية مفيدة للغاية لتشخيص ورصد العديد من الأمراض.

تسمح لطاخة الدم بتحديد عدد الأنواع المختلفة من خلايا الدم البيضاء (صيغة الكريات البيض) ، بالإضافة إلى السماح بتحليل التشكل وشكل كريات الدم الحمراء ، الكريات البيض والصفائح الدموية.

يمكن أن يكتشف خللًا في عدد الخلايا ، مثل: زيادة عدد الكريات البيضاء أو قلة الكريات البيض ، الخلايا الليمفاوية أو قلة الكريات ، قلة العدلات أو قلة العدلات ، قلة الصفيحات أو قلة الصفيحات واللازمات الحمضية. يمكن ملاحظة الشذوذ في شكل وحجم الخلايا.

بالإضافة إلى ذلك ، من الممكن اكتشاف أنواع مختلفة من فقر الدم وسرطان الدم والالتهابات البكتيرية أو طفيليات الدم.

لهذا هناك أنواع مختلفة من المسحات التي يتم إجراؤها اعتمادًا على الغرض من الدراسة. هناك مسحات من انخفاض غرامة ومسحة سميكة. هذه المسحات تختلف في أسلوب التنفيذ والغرض من الدراسة.

يستخدم النقرس الرفيع كمكمل لاستكمال أمراض الدم. هذا يوفر بيانات صيغة الكريات البيض ، بالإضافة إلى تحليل شكل ومورفولوجيا سلسلة الخلايا الثلاث التي تتكون منها الدم: السلسلة الحمراء ، السلسلة البيضاء والصفائح الدموية. على الرغم من أنها تخدم أيضا كمكمل لدراسة الدم الكثيف.

يستخدم سمك لتشخيص الأمراض الناجمة عن الطفيليات ، مثل الملاريا أو الملاريا ، داء المقوسات ، داء الليشمانيات ، مرض شاغاس ، داء البابلية والطفيليات الدقيقة.

خصائص مسحة الدم

يجب أن تلطخ مسحة الدم الجيدة بخصائص معينة. من بينها يمكن ذكرها:

- يجب أن تفي العينة بالحد الأدنى لمتطلبات الجودة لتكون ممثلة.

- يجب أن يتم تنفيذ العينة بشكل جيد.

إعدام المسحة.

- إذا تم ذلك بالدم الوريدي ، استخدم مضادات التخثر التي لا تشوه الخلايا وتخلط الأنبوب قبل القيام بالمسحة.

- إذا تم ذلك باستخدام دم شعري ، فتجاهل أول قطرة.

- يجب أن يكون انتشار متجانسة. هذا يضمن أن يتم توزيع الخلايا بالتساوي وأنه يمكن إجراء تحليل جيد لخلايا الدم ، من حيث الشكل والعدد.

- يجب أن تكون جوانب المسحة ناعمة من البداية إلى النهاية.

- يجب أن تحترم اللطاخة هامش يتراوح من 1 إلى 2 مم على جوانب الشريحة.

- يجب أن تنخفض سماكة طبقة الرصف تدريجياً من البداية إلى النهاية (تشويه المسحة الدقيقة بواسطة طريقة الشريحة).

-يجب أن يكون المسمى بشكل صحيح لتجنب الخلط بين العينات.

-Fix وصمة عار بشكل صحيح لمراقبة حادة من عناصر الدم.

- اترك اللطخة حتى تجف جيدًا قبل تركيب المستحضر تحت المجهر. إن وضع زيت الغمر على مسحة مبللة سوف يتسبب في تكوين micelles التي تعيق مراقبة الخلايا.

أنواع تشويه الدم

يمكن تصنيف لطاخات الدم المحيطية كطاخات قطرة رقيقة ومسحات سميكة. تُستخدم عينات الأغشية الرقيقة لدراسة صيغة الكريات البيض والمراقبة المورفولوجية لخلايا الدم. يمكن أيضًا رؤية البكتيريا خارج الخلوية ، مثل البروريل والطفيليات داخل الخلايا ، مثل البلازوديوم ، من بين أشياء أخرى.

في القطرة الدقيقة ، يمكن التعرف على أنواع الطفيل ، وبالتالي ، فهي تقنية أكثر تحديداً من القطرة السميكة ، ولكن القطرة السميكة أكثر حساسية ، لأنها تقنية تركيز تستخدم للبحث الشامل عن الطفيليات خارج الخلية.

هناك نوعان من مسحات الأغشية الرقيقة: تلك المصنوعة في شرائح الشرائح وتلك المصنوعة في شرائح ساترة. تصنع الأغشية الرقيقة على شرائح.

تقنيات لأخذ عينة من الدم

يمكن إجراء مسحات دموية من خلال ثقب شعري أو من عينة وريدية مأخوذة من مضادات التخثر. إذا كانت مصنوعة من الدم باستخدام مضادات التخثر ، يمكن تحضير اللطاخة لمدة ساعتين بعد أخذ العينة.

ينبغي للمرء أن يكون حذرا في استخدام مضادات التخثر التي لا تشوه خلايا الدم. الخيار الأفضل هو EDTA. على العكس من ذلك ، يجب تجنب استخدام مضادات التخثر مثل سترات الصوديوم.

إذا تم أخذ العينة عن طريق ثقب الشعيرات الدموية ، فيجب إجراء تمدد اللطاخة على الفور ، قبل تخثر الدم.

يجب التخلص من أول قطرة ، مع ترك القطرة التالية تلقائيًا لتجنب تخفيف العينة بسائل الأنسجة. هذا هو الأسلوب الأكثر الموصى به لمراقبة مورفولوجيا الخلية ، حيث لا يحتوي الدم على أي مادة مضافة.

من أجل مراقبة الطفيليات ، خلص Solari والمتعاونون في بحثهم إلى أن كلا التقنيتين (بزل الوريد والشعيرات الدموية) يتسمان بالكفاءة على حد سواء.

تقنيات لوضع مسحة الدم

يمكن إجراء تشويه الدم يدويًا على شرائح أو ساترة أو رقائق معدنية. ومن الممكن أيضا من خلال المعدات الآلية.

-Frotis في الشرائح

إنها التقنية المفضلة لمعظم المختبرات لسهولة معالجتها.

مع ماصة باستور ، يتم وضع قطرة من الدم غير سميك أو رفيع جدًا في وسط أحد طرفي الشريحة النظيفة.

بمساعدة شريحة أخرى ذات نهايات بلورية ، يتم إجراء اللطاخة. يتم وضع الشريحة الزجاجية الأرضية بشكل عمودي في الطرف المقابل للهبوط.

يميل حتى يشكل زاوية ما بين 30-45 درجة وينزلق نحو الانخفاض. عند لمسها ، فإنها تتوسع خطيًا على حافة الشريحة المصقولة ، ويتم إرجاع الورقة بحركة ثابتة ومحددة ؛ قبل الوصول إلى النهاية ، يتم رفع الشريحة.

بهذه الطريقة تنتشر طبقة متجانسة على سطح شريحة الاستقبال.

يُسمح للمسحة حتى تجف. ثم يتم إصلاحها وملطخة مع وصمة عار المفضل. يترك ليجف جيدًا قبل الملاحظة تحت المجهر. يتم وضع قطرة من الزيت على وجه اللطخة ويلاحظ تحت المجهر الضوئي.

أجزاء من مسحة أجريت على الشرائح

في هذا النوع من اللطاخة ، يمكن تمييز ثلاث مناطق محددة: الرأس والجسم والذيل. يتوافق الرأس مع المنطقة التي تبدأ فيها اللطاخة ، وهي المنطقة الأكثر ثخانة وليس من الجيد ملاحظتها.

الجسم هو الجزء المركزي أو الوسيط من اللطاخة ، إنه أفضل مكان يمكن ملاحظته تحت المجهر ، لأن هناك خلايا موزعة بشكل موحد ويتم الحفاظ على مورفولوجيتها.

الذيل يتوافق مع الجزء الأخير من اللطاخة ؛ هنا التوزيع لم تعد موحدة ومورفولوجيا كرات الدم الحمراء تميل إلى أن تضيع.

مراقبة الجودة في تقنية الشريحة

في هذه التقنية تلعب دورا أساسيا:

- تنظيف وإزالة الشحوم من الشريحة: يضمن انزلاق جيد للعينة.

- حجم القطرة: مع قطرات كبيرة جدا سوف تحصل على انتشار أكثر سمكا وأطول ، مع انخفاض صغير جدا ، فإن السبريد سيكون أقصر ورقيقة للغاية.

-السرعة المطبقة في الامتداد: عند انخفاض السرعة ، تكون اللطاخة أرق ، وسرعة أعلى ستكون أكثر سماكة.

- زاوية التنفيذ: كلما كانت الزاوية أصغر حجمًا ، كلما زادت سماكة اللطاخة.

-Frotis على coverslips

لا يستخدم على نطاق واسع لأنه من المرهق التعامل مع ساترة الهشة ، ومع ذلك فإنه يوفر مزايا كبيرة ، لأنه يتم الحصول على توزيع أفضل للخلايا في جميع أنحاء اللطاخة.

يتم وضع قطرة غير سميكة أو رقيقة جدا في وسط ساترة. ضع ساترة أخرى فوقها مباشرة على الفور بحيث تبرز أطراف كل من ساترة الزوجين وتشكل نجمة.

سينتشر الهبوط تلقائيًا على سطح كل من coverslips. في نهاية الامتداد ، حرك كل شريحة إلى الجانب الآخر أحدهما الآخر (واحد إلى اليمين والآخر إلى اليسار) بسرعة.

توفر التقنية تشويهين بدلاً من واحدة.

يتم وضعها لتجف مع وجه ممتد. مرة واحدة جافة ، يتم إصلاحها وملطخة مع الأسلوب المفضل. يسمح ليجف. يتم وضع قطرة من زيت الغمر على شريحة ، ويتم وضع اللطاخ على الوجه الملطخ أسفله وملاحظته تحت المجهر.

مراقبة الجودة في تقنية ساترة

للحصول على مسحة جيدة بهذه التقنية ، من المهم:

- تنظيف الأغطية (يساعد الشريحة الجيدة للعينة).

-حجم الهبوط (يؤثر على سمك الانتشار).

- السرعة التي يتم بها فصل ساترة (تؤثر على تجانس انتشار).

مع المعدات الآلية

يمكن القيام بذلك من خلال أي من هذه المعدات: Spinner و Autoslide.

يتكون الدوار من وضع شريحة مع قطرة دم على طبق خاص للطرد المركزي. يتم الطرد المركزي للعينة بسرعات عالية ؛ بهذه الطريقة يتم تشكيل انتشار متجانس وغرامة للعينة. وله عيب إمكانية انحلال الدم في العينة.

Autoslide هو أداة تقوم بحركات ميكانيكية لتنفيذ المسحات على الشرائح. يمكنك أيضا إصلاح وصمة عار اللطاخة. ويمكن حتى أن تتكيف مع بعض عدادات أمراض الدم التلقائي.

تقنية تشويه سميكة

من أجل البحث عن الطفيليات الدموية ، يوصى بإجراء لطاختين: إحداهما ذات قطرة رقيقة وواحدة ذات قطرة سميكة.

أداء ثقب شعري ، وتنظيف أول انخفاض. ضع قطرة رفيعة على شريحة وقم بإجراء اللطاخة كما هو موضح أعلاه. بالنسبة للقطرة السميكة ، ضع قطرة كبيرة على شريحة أخرى ومدها إلى مربع يبلغ 1.55 مم. دع المسحتين تجف.

تلطيخ مسحة

يمكن استخدام بقع Giemsa أو Wright ، من بين أشياء أخرى ، لممارسة النقرس الدقيق. يوصى باستخدام Giemsa أو May-Grunwald Giemsa وصمة عار للدم الكثيف.

غيمسا وصمة عار

يتم إصلاح اللطاخة لمدة 3 دقائق باستخدام الميثانول ، ويتم تصريفه ويسمح ليجف مرة أخرى. ثم يتم تغطية اللطاخة بصمة جيمسا لمدة 10-15 دقيقة. يتم غسلها بالماء المقطر والسماح ليجف. لمراقبة المجهر ، يتم وضع قطرة من زيت الغمر.

رايت وصمة عار

تُغطى اللطخة بصبغة رايت لمدة 5 دقائق. تجاهل ووضع محلول العازلة في درجة الحموضة من 6 ، 8 لمدة 6 دقائق. تفجير الاستعداد للتجانس. تغسل بالماء المقطر واتركها حتى تجف. مراقبة المجهر.

أنواع المسحات التالفة

يحدث في المتدربين في تقنية انخفاض غرامة مع الشرائح.

تشويه مع مناطق مختلفة السماكة (رقيقة وسميكة تتخللها)

فذلك لأن الحركة المنفذة لم تكن ثابتة أثناء التمديد ، مما يجعل عمليات التوقف وإعادة التشغيل.

تشويه مع مسحات قصيرة جدا

لديهم سببان: أحدهما يرجع إلى رفع الشريحة المصقولة قبل الوصول إلى الطرف الآخر من الورقة. في هذه الحالة يكون سميكًا وقصيرًا للغاية.

من ناحية أخرى ، إذا كانت اللطاخة قصيرة ولكن رقيقة ، فذلك لأن حجم الهبوط كان صغيراً للغاية.

تشويه مع منطقة هائجة في نهاية المسحة

له عدة أسباب: أحدها أن الحافة المتجمدة معيبة ، أو أن الضغط الذي تمارس على شريحة الاستقبال يزداد في وقت الانتهاء من التمديد أو أن الحافة الأرضية للشريحة تلبس.

تشويه مع تشكيل فجوات أو مناطق مستديرة أو بيضاوية واضحة

وهي ناتجة عن استخدام مسحات دهنية (مغسولة بشكل جيد ومزيل الشحوم).

مسحات سميكة جدا أو رقيقة جدا

سوف تولد القطرات الكبيرة جدًا مسحات سميكة جدًا من البداية إلى النهاية وقطرات صغيرة جدًا مسحات رقيقة جدًا.

الأنسجة

يمكن رؤية خلايا الدم في مسحة دموية. من بينها:

كريات الدم الحمراء أو خلايا الدم الحمراء

ملاحظتك هي في غاية الأهمية. في هذا المستوى ، يمكن اكتشاف مشاكل فقر الدم والثلاسيميا ومرض نخاع العظم وما إلى ذلك.

عدد كريات الدم الحمراء أو خلايا الدم الحمراء حوالي 5 × 106 مم 3 في الرجال و 4.5 × 106 في النساء. تتشكل خلايا الدم الحمراء مثل أقراص biconcave ، مع شحوب فسيولوجية مركزية. يمكن ملاحظتها بشكل منفصل (عادي) أو تشكيل مداخن في rouleaux (غير طبيعي).

قد تُظهر المسحات أيضًا وجود كريات الدم الحمراء (كريات الدم الحمراء بأشكال مختلفة) ، خلل التنسج (كريات الدم الحمراء بأحجام مختلفة) ، كريات الدم الخلوي (الأشكال المختلفة والأحجام) ، التباين (ألوان مختلفة) ، كريات الدم الحمراء (كريات الدم الحمراء غير الناضجة) ، كريات الدم الحمراء ) والكريات الكبيرة (كرات الدم الحمراء الكبيرة).

عندما يكون هناك نقص في كمية الهيموغلوبين ويزيد الشحوب المركزي ، يقال أن هناك نقص في الصبغي. عندما يتم ملاحظة سلسلة حمراء طبيعية ، سيتم الإبلاغ عنها كقاعدة طبيعية وعادية اللون.

-الكريات البيضاء أو الكريات البيض

تتراوح الكمية العادية من 5000 إلى 10،000 مم 3. يتم تغييرها في العمليات المعدية ، في الحساسية وفي سرطان الدم. في المسحة الدموية يمكن تمييز عدة أنواع موضحة أدناه.

العدلات مجزأة

أنها تمثل 55-65 ٪ من إجمالي الكريات البيض. يقيسون ما بين 10-15 ميكرون. لديهم نواة مجزأة أو مفصصة تتبنى أشكالاً مختلفة ، ومن ثم يطلق عليها نواة متعددة الأشكال.

لديهم حبيبات العدلات الوفيرة في السيتوبلازم وبعض الآزوروفيل. أنها تزيد في الالتهابات البكتيرية (العدلات) ، وانخفاض في الالتهابات الفيروسية (قلة العدلات).

يمكن ملاحظة الحالات الشاذة المورفولوجية على أنها كثرة الحمر (نواة مفرطة المقطع) أو المحتالون (الخلايا غير الناضجة) أو الماكروبوليتيكوس (بيضاوي وكبير الحجم).

تعديلات أخرى:

الثغرات السامة

-Neutrófilos pseudo Pelger (لا تحتوي النواة على تزييت أو تمييع).

الهيئات -Döhle: الادراج السيتوبلازمية من اللون الأزرق الداكن.

- زيادة الخلايا القاعدية السيتوبلازمية.

لقاحات -Intracytoplasmic.

-تقنية الخلايا (فقدان الجسور النووية).

الحمضات مجزأة

أنها تمثل 1-3 ٪ من مجموع خلايا الدم البيضاء. يقيسون 9-10 ميكرون. وتتميز بوجود حبيبات سيتوبلازمية حمضية وفيرة وعدد قليل من الآزوروفيل. نواته تقدم تزييتين. يزيد عددهم في الحساسية والأمراض ذات الأصل الطفيلي.

قاعدية مجزأة

فهي نادرة للغاية ، وتمثل 0-1 ٪ من الكريات البيض. أنها قياس 10-12μm. عادة ما تكون النواة ذات حواف غير منتظمة ويمكن أن تكون ذات نهايات ، ولكن لا يتم ملاحظتها نظرًا لوجود عدد كبير من الحبيبات القاعدية الكثيفة في السيتوبلازم. نادرا جدا ما يمكن ملاحظه القاعده.

الخلايا الليمفاوية

إنها خلايا صغيرة تحتوي على السيتوبلازم القاعدي ، مع نواة ، محددة بشكل جيد ، مستديرة ، مع كروماتين مكثف. تغطي النواة الخلية بأكملها تقريبًا. أنها تمثل 26-40 ٪ من كريات الدم البيضاء. أنها تزيد في الالتهابات الفيروسية (الخلايا اللمفاوية). يمكن ملاحظة الخلايا اللمفاوية التفاعلية.

حيدات

خلايا أكبر من الخلايا اللمفاوية ، مع زيادة السيتوبلازم ونواة البيضاوي من الكروماتين فضفاضة. أنها قياس 9-12μm. السيتوبلازم وفير وعادة ما يكون أزرق رمادي باهت مع تقنيات التلوين المعتادة. بين التعديلات ، يمكن ملاحظة حيدات أحادية وخلايا monocytosis.

-Plaquetas

يقيسون بين 1.5-3 ميكرون. شكله مستدير أو بيضاوي. القيمة العادية تتراوح بين 150،000 إلى 350،000 صفائح / مم 3. يمكن أن تنخفض في بعض الالتهابات الفيروسية. ليس لديهم نواة وألوان زاهية. يمكن ملاحظة حدوث تشوهات في هذه السلسلة ، مثل وحدات الماكرو أو القوالب الدقيقة ، نقص الصفيحات أو نقص الصفيحات ، وشظايا الصفائح الدموية.

العناصر المرضية

الطفيليات الدموية

يمكن ملاحظة لطاخات الدم النازفة ، مثل العامل المسبب للملاريا أو الملاريا (طفيليات جنس المتصورة). لذلك من المهم أن يتم تحليل اللطاخة يدويًا ، حيث أن المعدات الآلية تمر دون أن يلاحظها أحد.

بكتيريا

في أمراض مثل الحمى المتكررة أو مرض لايم ، يمكن ملاحظة العامل المسبب لها. في هذه الحالة ، يتوافق مع البوريل ريلوريك ريستوريتي وبوريل بورغدورفيري في مسحة الدم.

خلايا غير ناضجة

يتم ملاحظة الحالات الشديدة في سرطان الدم ، وفي تفاعلات سرطان الدم وفي رد فعل خلايا الدم البيضاء ، من بين أمور أخرى. في الالتهابات البكتيرية قد يكون هناك انحرافات طفيفة في اليسار (وجود المحتالين). أيضا في بعض الأنيميا ، يمكن ملاحظة كرات الدم الحمراء.