الاختبارات المتقاطعة: من أجل ماذا ، المراحل الأساسية والأساسية

الاختبارات المتشابهة هي عبارة عن سلسلة من الدراسات المختبرية التي يتم إجراؤها لتحديد ما إذا كانت منتجات الدم من المتبرع (بشكل رئيسي الدم الكامل والتركيز الكروي) متوافقة مع دم المتلقي.

إنه اختبار تكميلي بالإضافة إلى توافق ABO وعامل Rh. سبب الاختبار التبادلي هو أنه في بعض الأحيان قد يكون لدى شخصين (متلقي المانح) نفس مجموعة ABO و Rh ولكن دمهما لا يزال غير متوافق.

يرجع عدم التوافق هذا إلى وجود أجسام مضادة ضد سلسلة من بروتينات خلايا الدم الحمراء المعروفة باسم المستضدات الثانوية. لا يتم تقييم هذه المستضدات بشكل روتيني كما هو الحال مع فصيلة الدم (ABO) وعامل Rh.

هذا لأن المستضدات الثانوية أقل تواتراً ولديها تعبير متغير في كل فرد ، لذلك من المستحيل فعليًا تجميعها في فئات كما هو الحال مع المجموعة وعامل Rh.

بدلاً من ذلك ، يتم خلط خلايا الدم الحمراء المانحة مع مصل المريض (اختبار التوافق الرئيسي) وخلايا الدم الحمراء للمريض مع مصل المتبرع (اختبار التوافق البسيط) من أجل اكتشاف وجود تفاعلات الأجسام المضادة للمستضد.

عندما تكون هناك أجسام مضادة ضد المستضدات الثانوية ، سواء في مصل المريض أو المتبرع ، يقال إن الاختبار إيجابي ، لذلك في معظم الحالات لا يمكن نقل وحدة الدم المعينة.

مجموعة ABO

لفهم جيدًا أن التفاعلات المتقاطعة يتم التعامل معها أولاً ، من الضروري معرفة الأساسيات حول فصائل الدم.

وبهذا المعنى ، فإن أهم شيء هو معرفة أنه يمكن تصنيف الدم إلى أربع مجموعات: A و B و AB و O.

تعرب كل مجموعة من هذه المجموعات عن سطح البروتين المعين (مستضد) على سطح خلايا الدم الحمراء ، والذي يتم تعريفه كعنصر غريب بواسطة الأجسام المضادة لمستقبلات محتملة لمجموعة مختلفة.

أكثر ما يلفت الانتباه في تفاعلات الجسم المضاد في توافق الدم هو أنه لا يلزم التعرض المسبق للمستضد لوجود الأجسام المضادة. هذا هو المعروف باسم الأجسام المضادة الطبيعية.

الأجسام المضادة الطبيعية

بشكل عام ، لكي توجد الأجسام المضادة في جسم الفرد ، من الضروري أن تكون خلايا الدم البيضاء قد تعرضت سابقًا للمستضد.

هذا يعني أنه عند أول اتصال بين المستضد الأجنبي والكائن الحي ، لا توجد أجسام مضادة ، حيث يتم توليدها لاحقًا بعد الاتصال الأولي. لذلك ، يستحيل على الجهاز المناعي وجود أجسام مضادة ضد فيروس معين ، على سبيل المثال ، إذا لم يتعرض له في الماضي.

الاستثناء الوحيد لما سبق هو المستضدات المضادة لـ AB. في هذه الحالات ، يكون لدى الشخص أجسام مضادة ضد المستضد لا تمتلكها خلايا الدم الحمراء حتى لو لم تكن على اتصال بخلايا الدم الحمراء لشخص آخر. هذا هو المعروف باسم الأجسام المضادة الطبيعية.

المستضدات والأجسام المضادة المرتبطة بفصيلة الدم

يتم تحديد مجموعات الدم في حالة نظام ABO من خلال وجود مستضدات معينة (A أو B) في غشاء خلايا الدم الحمراء ، وعلى النقيض من ذلك ، فإن الأجسام المضادة ضد المستضد الغائب في غشاء الكريات الحمراء.

وهكذا ، فإن الشخص المصاب بفصيلة الدم A يعبر عن المستضد A على سطح خلايا الدم الحمراء ، بينما توجد في الجسم أجسام مضادة مضادة لـ B.

على العكس من ذلك ، في مرضى المجموعة B ، يتم العثور على المستضد B ، في حين أن الأجسام المضادة تكون مضادة لـ A.

الآن ، يعاني المرضى المصابون بدم AB من المستضدات A و B. لذلك ، لا توجد أجسام مضادة ، لأن القيام بذلك من شأنه أن يدمر خلايا الدم الحمراء لهذا الشخص.

يحدث العكس في المجموعة O ، حيث لا يقدم غشاء الكريات الحمراء أيًا من المستضدين (لا A و B) ، بينما في المصل توجد أجسام مضادة مضادة A و B.

مجموعة ABO عدم التوافق

مما سبق ، يمكن بسهولة استنتاج توافق مجموعات الدم ABO ، لأن مستضد الغشاء كرات الدم الحمراء يعرف تلقائيًا بأجسام مضادة في المصل. على النحو التالي:

- الدم A متوافق مع المجموعة A والمجموعة O.

- فصيلة الدم B متوافقة مع الدم B و O.

- يمكن للأشخاص الذين يعانون من المجموعة O تلقي الدم O فقط (نظرًا لأن لديهم أجسامًا مضادة لـ A و B) ، على الرغم من أن دمائهم يتلقونها جميع المجموعات الأخرى دون مشاكل نظرًا لأنها تفتقر إلى المستضدات.

- أخيرًا. يمكن لأولئك الذين لديهم فصيلة دم AB الحصول على الدم من جميع المجموعات الأخرى (A ، B ، O وبالطبع AB) ، لأنهم ليس لديهم أجسام مضادة ضد أي من المستضدات. ومع ذلك ، يمكن فقط لأفراد AB الحصول على دم AB ، لأن جميع المجموعات الأخرى لديها أجسام مضادة تدمر خلايا الدم الحمراء هذه.

المستضدات الصغرى

كما هو الحال مع مجموعات ABO ، يمكن العثور على سلسلة من البروتينات التي تعمل كمضادات على سطح كرات الدم الحمراء ، كما هو الحال مع مستضدات مجموعة ABO.

ومع ذلك ، فإن هذه المستضدات لا تحدث في جميع الأفراد. تركيبة غير متجانسة والاختراق (مستوى التعبير عن البروتين) متغير ، وبالتالي فإنه من المستحيل أن تصنف في مجموعات مثل تلك الموجودة ل ABO و Rh. من هناك ، تستمد اسمها من "المستضدات الثانوية" ، والمعروفة أيضًا باسم "مستضدات الإصابة المنخفضة".

على الرغم من أنها ليست متكررة ، فقد تكون هناك أجسام مضادة طبيعية ضد المستضدات الثانوية. من بينها الأكثر شيوعا لويس ، MNSs ، مكافحة N ، Kell ، Duffy ، Anti Fyb و Kidd. كلهم مسؤولون عن ردود الفعل الانحلالي خطيرة للغاية وما بعد نقل الدم.

بالإضافة إلى ذلك ، قد تكون هناك حالات حساسية ضد المستضدات الثانوية عن طريق الاتصال المسبق ، إما مع بروتينات المستضد المذكورة بسبب عمليات النقل السابقة أو بسبب المناعة المتبادلة.

عبر الحصانة

يقال أن هناك مناعة متقاطعة عندما يكون مستضدان من مصدرين مختلفين (على سبيل المثال ، خلايا الدم الحمراء والبكتيريا) متشابهان للغاية ، لدرجة أن الأجسام المضادة ضد أحد البروتينات المضادة للمستضد المذكور تتفاعل أيضًا مع الأخرى لأنها متطابقة تقريبًا .

لفهمها بشكل أفضل ، خذ المثال الافتراضي السابق (مستضدات خلايا الدم الحمراء والبكتيريا). في كلتا الحالتين لا توجد الأجسام المضادة الطبيعية ، ولكن إذا تعرض الشخص للبكتيريا ، فإنها ستنتج الأجسام المضادة ضدها.

سوف تتفاعل مثل هذه الأجسام المضادة في وقت لاحق ضد خلايا الدم الحمراء إذا كانت مستضدات هذه الخلية مشابهة جدا لتلك الموجودة في البكتيريا التي تسببت في تكوين الأجسام المضادة.

في حالة حدوث ذلك ، لا يمكن إعطاء خلايا الدم الحمراء التي تحتوي على هذا البروتين المضاد إلى الشخص الذي لديه الأجسام المضادة ، حيث سيكون هناك رفض. وهنا تكمن أهمية ردود الفعل المتصالبة.

ما هي اختبارات الصليب؟

نظرًا لأنه من المستحيل وصف دماء الأفراد المختلفين في مجموعات على أساس المستضدات الثانوية ، فإن الطريقة الوحيدة لمعرفة ما إذا كانت توجد في دم شخص ما أجسام مضادة ضد المستضدات الثانوية لخلايا الدم الحمراء لدى شخص آخر يتم من خلال الاختبارات التبادلية .

في تلك الحالات التي توجد فيها الأجسام المضادة ، يتم تشغيل تفاعل انحلال الدم أو تراص الدم ، لذلك يستنتج أن التفاعل كان إيجابياً ؛ بمعنى ، توجد أجسام مضادة ضد المستضدات الثانوية (على الرغم من أنه غير معروف بالضبط ما). خلاف ذلك ، فإن الاختبار هو سلبي.

مؤسسة

تعتمد الاختبارات المتقاطعة على تفاعل الجسم المضاد. لذلك ، من الممكن اكتشاف ما إذا كانت هناك أجسام مضادة في مصل المستقبلات ضد مستضدات خلايا الدم الحمراء للمانحين (أو العكس) مما يؤدي إلى تفاعل الجسم المضاد.

إذا لم تكن هناك أجسام مضادة ، فلن يحدث أي تفاعل ويبلغ الاختبار على أنه سلبي. على العكس من ذلك ، إذا كان رد الفعل إيجابيًا (يوجد انحلال أو تراص أثناء الاختبار) ، يمكن استنتاج أن الأجسام المضادة موجودة.

في هذا الصدد ، من المهم أن نلاحظ أنه قد تكون هناك أجسام مضادة ضد خلايا الدم الحمراء في مصل الدم المانح والمستلم. هذا هو السبب في وجود نوعين من ردود الفعل المتقاطعة.

أنواع ردود الفعل المتقاطعة

من المحتمل وجود أجسام مضادة ضد كريات الدم الحمراء لدى مصل المريض ؛ لكن العكس قد يكون صحيحًا أيضًا ، أي الأجسام المضادة في مصل المتبرع ضد خلايا الدم الحمراء للمريض.

لهذا السبب يوجد نوعان من الاختبارات التبادلية:

- اختبار الصليب أكبر.

- اختبار الصليب الصغرى.

يتم إجراء كلا النوعين بشكل روتيني في بنك الدم قبل نقل منتجات الدم ، بالنظر إلى أنه إذا كان أي من الاختبارات إيجابيًا ، فهناك خطر كبير من تفاعلات نقل الدم التي قد تعرض حياة المريض للخطر.

أكبر اختبار الصليب

في هذا الاختبار ، يتم تقييم ما إذا كانت هناك أجسام مضادة ضد خلايا الدم الحمراء للمتبرع في مصل المتلقي.

في حالة حدوث ذلك ، لا يمكن إعطاء منتجات الدم ، حيث إن عددًا كبيرًا من الأجسام المضادة الموجودة في بلازما المريض ستدمر خلايا الدم الحمراء للمانحين بسرعة كبيرة ، مما يولد ردود فعل كارثية في جسم المستلم أثناء العملية. ردود الفعل هذه شديدة لدرجة أنها يمكن أن تهدد حياتك.

اختبار الصليب الصغرى

في هذه الحالة ، يتم تحديد ما إذا كانت هناك أجسام مضادة في مصل المتبرع ضد خلايا الدم الحمراء للمستلم.

إذا كان الأمر كذلك ، ستبدأ الأجسام المضادة في تدمير كريات الدم الحمراء للمستقبل. ومع ذلك ، نظرًا لأن كمية الأجسام المضادة محدودة ، يكون رد الفعل أقل كثافة. على الرغم من أنها لا تزال خطيرة.

مراحل

تنقسم اختبارات الصليب الرئيسية والثانوية إلى ثلاث مراحل:

- سالينا.

- الحرارية أو الحضانة.

- كومبس.

في المرحلة الأولى ، يتم خلط خلايا الدم الحمراء والمصل في المياه المالحة. بعد ذلك ، يتم إضافة الزلال ، ويتم تحضين العينة عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة للمضي قدمًا في مرحلة coombs.

تقنية

طريقة الاختبار المتبادل بسيطة نسبيًا ، حيث تتضمن إضافة خلايا الدم الحمراء المانحة إلى مصل المريض (اختبار رئيسي كبير) بالإضافة إلى كريات الدم الحمراء المستلمة إلى مصل المتبرع (اختبار ثانوي طفيف).

للحث على تفاعل الجسم المضاد في وقت قصير نسبيا ، يجب اتباع سلسلة من الخطوات الموحدة. يتم تلخيص هذه الخطوات بطريقة مبسطة أدناه.

من المهم أن نأخذ في الاعتبار أنه في القسم التالي يتم وصف اختبار التوافق الأكبر ، على الرغم من أن الخطوات هي نفسها لاختبار التوافق البسيط ، ولكن يتم تبادل أصل خلايا الدم الحمراء والمصل.

المرحلة المالحة

- أضف إلى أنبوب اختبار 2 قطرات من المصل من المتلقي (من المتبرع إذا كان اختبار طفيفة).

- خذ عينة من خلايا الدم الحمراء المانحة (من المتلقي إذا كان اختبار طفيفة).

- اغسل وطرد خلايا الدم الحمراء.

- إعادة تعليق في حل ما بين 3 ٪ و 5 ٪.

- ضع قطرة من هذا المحلول في الأنبوب الذي يحتوي على مصل المتلقي.

- اخلطي برفق.

- أجهزة الطرد المركزي.

- اقرأ النتيجة في مصباح العرض.

المرحلة الحرارية

- أضف قطرتين من الزلال بنسبة 22 ٪ إلى الأنبوب حيث تم الانتهاء من المرحلة المالحة.

- احتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

- أجهزة الطرد المركزي لمدة 15 ثانية.

- اقرأ النتيجة في مصباح العرض.

مرحلة كومبس

- خذ الخلايا من الأنبوب وغسلها بالمحلول الملحي.

- انزع طاف.

- أضف قطرتين من كاشف كومبس.

- اخلطي برفق.

- أجهزة الطرد المركزي من 15 إلى 30 ثانية.

- إعادة تعليق الخلايا وتقييمها في مصباح التصور بحثا عن تراص أو انحلال الدم.

إذا كان هناك تراص أو انحلال في أي مرحلة من المراحل ، تعتبر النتيجة إيجابية.